德國MB公司的支原體qPCR試劑盒 ——適合藥廠檢測的金標準

藥典對生物藥廠的細胞種子批、病毒收獲液及細胞治療產(chǎn)品等都規(guī)定要求不含支原體。它是保證生物制品安全和質(zhì)量的重要指標之一。

但傳統(tǒng)支原體檢查方法如培養(yǎng)法和DNA染色法都存在一定的局限，如所需時間長，操作較為復(fù)雜（培養(yǎng)法），存在假陽性和假陰性的情況（特別是染色法）。

支原體核酸檢測法

（包括常規(guī)PCR和qPCR）

以其檢測時間短（僅需2-3小時）、

靈敏度好和特異性高、

操作簡單而廣受青睞。

目前國內(nèi)外藥廠放行檢測及方法驗證

（product release testing）

采用的較多的是德國MB公司的:

支原體qPCR檢測試劑盒（經(jīng)典法)

和支原體常規(guī)PCR檢測試劑盒（經(jīng)典法）。

其中，

支原體qPCR檢測試劑盒

由于無須跑膠，且能定量，因而更受歡迎。

德國MB公司的

支原體qPCR檢測試劑盒（經(jīng)典法）

被稱為支原體檢測的金標準，

主要基于以下幾個原因：

1. 遵循歐洲藥典和日本藥典要求。德國MB公司對該試劑盒進行了全面的驗證，包括靈敏度、特異性和耐用性，并提供有驗證報告，符合歐洲藥典（EP 2.6.7）和日本藥典（JP G3）規(guī)定，因而可替代傳統(tǒng)的培養(yǎng)法和染色法。以靈敏度和特異性為例。

經(jīng)典法qPCR試劑盒對以下歐洲藥典規(guī)定的9種支原體的最低檢測限均達到≤10CFU/ml

經(jīng)典法qPCR試劑盒一次檢測可涵蓋所有可能污染細胞的支原體物種（涵蓋歐洲藥典規(guī)定的9種支原體），而對細菌和真核細胞DNA沒有交叉反應(yīng)（見下表）。

2. 經(jīng)典法qPCR試劑盒含qPCR mix、陽性支原體DNA對照、內(nèi)控DNA對照，均為凍干粉，穩(wěn)定性強，復(fù)溶后即可使用。內(nèi)控DNA對照，可監(jiān)測支原體DNA抽提過程，以及是否存在PCR抑制導(dǎo)致的假陰性。

3. 歐洲和日本藥典要求核酸法需包括樣品的DNA抽提，再行支原體檢測。

德國MB公司的支原體DNA提取試劑盒，具有極好的抽提效果，即使痕量支原體（如10CFU）提取DNA后也可檢測出來。在用于工業(yè)放行檢測時，經(jīng)典法qPCR試劑盒與該試劑盒配合使用。

4．德國MB公司提供有全面的標準品，用于支原體核酸法的方法驗證。

包括10CFU和100CFU支原體靈敏度標準品（用于靈敏度和耐用性驗證）、

支原體基因組DNA和細菌基因組DNA（10ng/管，用于特異性驗證）、

qPCR絕對定量標準品（1X108基因組拷貝，用于繪制標曲和絕對定量）。

其中支原體靈敏度標準品還提供有GU：CFU比值（支原體基因組/菌落數(shù)比值），便于二者的換算。

德國MB公司的經(jīng)典法qPCR試劑盒兼容許多品牌的qPCR儀，為雙通道檢測：支原體檢測用FAM通道, 內(nèi)控對照用HEX通道。如儀器沒有HEX通道，也可選VIC通道。具體設(shè)置請參考廠家的儀器設(shè)置文件。

產(chǎn)品信息如下：

存儲：2-8℃。復(fù)溶后在-18℃以下保存。

配套產(chǎn)品:

存儲：室溫