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技術(shù)專欄

單增李斯特氏菌顯色培養(yǎng)基（ALOA法）使用方法

2018-09-13 13:10來(lái)源：締一生物

單核細(xì)胞增生李斯特氏菌是一種革蘭氏陽(yáng)性食源性人類病原體，使孕婦嚴(yán)重感染并最終可能導(dǎo)致流產(chǎn)、死胎、新生兒李斯特氏菌病和腦膜炎或成人和青少年原發(fā)性菌血癥。由于單核細(xì)胞增生李斯特氏菌和英諾克李斯特氏菌具有相似的生化特性，傳統(tǒng)培養(yǎng)基（PALCAM培養(yǎng)基）不能區(qū)分。這里推薦一款HiMedia公司生產(chǎn)的單增李斯特菌顯色培養(yǎng)基（貨號(hào)MV1540）分離單核細(xì)胞增生李斯特菌，它在制備時(shí)用無(wú)瘋牛病風(fēng)險(xiǎn)的植物蛋白胨取代了動(dòng)物蛋白胨，使用安全。

單增李斯特菌顯色培養(yǎng)基（貨號(hào)MV1540）使用方法

36.02g干粉溶于460mL蒸餾水。加熱沸騰使干粉完全溶解。

15磅（121℃）滅菌15分鐘。

取李斯特氏菌增菌添加劑（貨號(hào)FD214）1管放置室溫融化。

取李斯特氏菌選擇性添加劑I（貨號(hào)FD212）1管，添加10mL無(wú)菌蒸餾水復(fù)溶。

取李斯特氏菌選擇性添加劑II（貨號(hào)FD213）1管，添加2mL 0.2N氫氧化鈉，再加3mL無(wú)菌蒸餾水復(fù)溶。

待460mL培養(yǎng)基冷卻至45-50°C，無(wú)菌加入以上復(fù)溶的3種添加劑?；靹虿A注于無(wú)菌平皿中。

培養(yǎng)基無(wú)菌加入3種添加劑（FD212,FD213,FD214）制備好后，接種下列菌種，35-37℃孵育24-48小時(shí)后觀察培養(yǎng)反應(yīng)。

警告：氯化鋰是有害的。避免身體接觸和吸入蒸氣。一旦與皮膚接觸，應(yīng)用大量水沖洗。