細胞實驗室如何預(yù)防支原體污染？

在拿到細胞到開始培養(yǎng)的過程中，預(yù)防支原體污染應(yīng)注意以下幾點：

1.新購產(chǎn)品檢測

新到的細胞、培養(yǎng)基、血清都可以做一下簡單的污染檢測后再開始實驗。另外要注意每次試劑量配制不宜過多，建議分裝使用，分裝時用針頭濾器過濾一次。

2.控制環(huán)境污染

要保證實驗室和培養(yǎng)箱的潔凈，按時殺菌，可以用酒精擦拭和紫外照射的方法。必要時可以通臭氧過夜。

3.嚴格無菌操作

進行實驗操作時一定要按照實驗室的要求，確保無菌操作。感冒咳嗽時盡量不要使用細胞房，如果必須使用，請在實驗后徹底清潔消毒使用空間。準備好細胞房專業(yè)潔凈衣，戴好口罩和手套。

所有進超凈臺的物品**都用酒精擦拭一遍，超凈臺里面的東西一定要盡量少放，東西太多會影響超凈臺內(nèi)空氣流通及空氣除菌細胞培養(yǎng)基和器材要保證無菌;

4.最小化抗生素使用頻率

非珍貴細胞污染直接丟棄，避免抗生素濫用導致抗藥性產(chǎn)生。

支原體污染細胞后，特別是重要的細胞株，有必要清除支原體，常用方法有抗生素處理、抗血清處理、抗生素加抗血清和補體聯(lián)合處理。

支原體最突出的結(jié)構(gòu)特征是沒有細胞壁，一般來講，對作用于細胞壁生物合成的抗生素，如內(nèi)酰胺類、萬古霉素等完全不敏感；對多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺藥物普遍耐藥。對支原體最有抑制活性、常用于支原體感染治療的抗生素是四環(huán)素類、大環(huán)內(nèi)酯類及一些氟喹諾酮。

支原體污染在細胞培養(yǎng)中實際上是比較常見的, 據(jù)資料, 可達30%甚至更高。支原體污染時細胞表現(xiàn)為長得不好,也不死亡, 同時, 培養(yǎng)基又是清亮的。時間長達一周也沒有什么變化。這時基本上可以判斷出是支原體污染了, 愿意檢測就檢測一下，不愿意直接用清除試劑處理。

避免細胞污染，可以從預(yù)防著手，超凈工作臺物品放置要合理、進入細胞房要換鞋，穿實驗服，實驗員戴手套后要用酒精消毒、避免細胞交叉污染等。