支原體檢測(cè)之符合藥典方法驗(yàn)證

支原體檢測(cè)的藥典方法主要包括兩種：分離培養(yǎng)法和指示細(xì)胞法。

分離培養(yǎng)法是檢測(cè)支原體的金標(biāo)準(zhǔn)方法，其原理是從樣品細(xì)胞培養(yǎng)體系中取樣，接種到適宜支原體生長的瓊脂平板上。如果樣本中含有支原體，它們就會(huì)在這種瓊脂平板上瘋狂生長，最終形成明顯可見的特征性菌落。這種方法很少會(huì)出現(xiàn)假陰性結(jié)果，檢測(cè)精確度很高，因此被譽(yù)為支原體檢測(cè)金標(biāo)準(zhǔn)。該方法也是《美國藥典》中認(rèn)可的支原體檢測(cè)方法之一。然而，這種方法的缺點(diǎn)是檢測(cè)時(shí)間太長，支原體要長出明顯克隆至少需要4周時(shí)間。

指示細(xì)胞法是將供試品接種于指示細(xì)胞（無污染標(biāo)準(zhǔn)化Vero細(xì)胞或經(jīng)國家藥品檢定機(jī)構(gòu)認(rèn)可的其他細(xì)胞，供試品應(yīng)對(duì)該細(xì)胞生長無影響）中培養(yǎng)后，用特異熒光染料進(jìn)行染色，支原體中的核酸也可以被著色。該方法的優(yōu)點(diǎn)是操作規(guī)范的情況下，很少出現(xiàn)假陰性結(jié)果，檢測(cè)精確度很高。

此外，還有核酸法、化學(xué)發(fā)光法等支原體檢測(cè)方法。其中，PCR法是目前最常用的方法，其原理是在支原體16S rRNA基因的保守區(qū)設(shè)計(jì)引物，通過檢測(cè)支原體DNA來檢測(cè)細(xì)胞中有無支原體的污染。如果有支原體的存在，則在瓊脂糖凝膠電泳或者熒光定量擴(kuò)增時(shí)，就可以檢測(cè)到。這種方法的優(yōu)點(diǎn)是檢測(cè)靈敏度高、特異性好、檢測(cè)速度快。

德國MB公司生產(chǎn)的Venor?Gem qEP，符合歐洲藥典EP、美國藥典USP、日本藥典JP、中國藥典等各國藥典要求，可在細(xì)胞和生物制品，如Car-T、細(xì)胞免疫、抗體藥、疫苗等項(xiàng)目中，替代培養(yǎng)法進(jìn)行支原體檢測(cè)。高特異性！一次檢測(cè)即可涵蓋，所有可能感染細(xì)胞的支原體物種。高靈敏度！檢測(cè)限可達(dá)≤10CFU/ml。