微生物法測定葉酸含量的改進

葉酸是乳酸桿菌生長的必需營養(yǎng)素，微生物法檢測葉酸是利用乳酸桿菌生長速度與葉酸含量相關(guān)的原理建立的。與其他葉酸檢測的方法相比，微生物法具有許多優(yōu)點：樣品預處理簡單、對設(shè)備要求不高、成本低廉等。

許多國際機構(gòu)都將微生物法作為葉酸分析的標準方法，我國國家標準《嬰幼兒配方食品和乳粉通用檢驗方法》中測定葉酸的方法即為微生物法。1988 年 Horrne 等應用 96 孔細胞培養(yǎng)板以干酪乳酸桿菌(Lactobacillias Casei)對葉酸進行微量檢測，將甘油冷凍保存乳酸桿菌與96孔酶標板相結(jié)合，使得測定時間大為縮短。菌株對多數(shù)葉酸形式反應相似，能測定單和多谷氨酸葉酸，靈敏度很高，能達到ng 水平，具有較高的靈敏度和重現(xiàn)性。

這一方法對菌種的處理、分裝和保存，以及操作過程都作了重大改進，已被認為是目前最可靠、簡便、迅速和微量檢測葉酸的方法。

96 孔板微生物法測葉酸能夠獲得準確、可靠、重復性好的結(jié)果。稀釋倍數(shù)對測定結(jié)果影響不大，結(jié)果穩(wěn)定?？紤]其成本低廉，樣本預處理簡單以及對設(shè)備要求不高等優(yōu)點，適合于大批量測定，可用于大樣本的血液流行病學研究。此方法還可用于其他生物組織和食品中葉酸含量的測定，這對國內(nèi)開展葉酸檢測有著較大的意義。

應用96孔板法測定葉酸含量時，選擇測定用葉酸培養(yǎng)基，這里推薦的是國際上HiMedia公司生產(chǎn)的葉酸測定用培養(yǎng)基（貨號：M543），該培養(yǎng)基由國際**Himedia Laboratories生產(chǎn)，嚴格遵循國際標準，國產(chǎn)葉酸培養(yǎng)基含有痕量葉酸，易導致測定結(jié)果偏高，實驗準確性比較差，HiMedia葉酸測定用培養(yǎng)基有國際認證的GMP，CE和FDA，ISO9001，ISO13485等證書，成分符合《GB5009.211-2014 食品安全國家標準 食品中葉酸的測定》，測定結(jié)果準確性高。