人畜共患病原菌——產(chǎn)氣莢膜梭菌

產(chǎn)氣莢膜梭菌是一類革蘭氏陽(yáng)性（G+）產(chǎn)芽胞的厭氧性梭菌，廣泛分布于污水、土壤、食物、人畜糞便及腸道中，是人畜共患病原菌。已經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)該菌能產(chǎn)生15種外毒素，其中最重要的致死性毒素有α、β、ε、ι 四種，按分泌毒素的類型可將該菌分為 A、B、C、D、E　五種。產(chǎn)氣莢膜梭菌是引發(fā)組織毒害感染（如人類氣性壞疽）和腸道疾病（如人類 D 型產(chǎn)氣莢膜梭菌食物中毒和家畜腸毒血癥）的重要因素。因此，有效的分離和鑒定產(chǎn)氣莢膜梭菌對(duì)人類健康有著重要意義。

有報(bào)道指出，大腸菌群作為水質(zhì)微生物學(xué)指標(biāo)是不可靠的，而產(chǎn)氣莢膜梭菌可作為一個(gè)水污染的指示菌。歐洲已將其作為水質(zhì)衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)的補(bǔ)充條款，WHO已在水質(zhì)檢測(cè)中將其作為水質(zhì)污染的微生物。產(chǎn)氣莢膜梭菌數(shù)量與水污染程度有一定的相關(guān)關(guān)系。我國(guó)《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 飲用天然礦泉水檢驗(yàn)方法》GB8538—2016規(guī)定，天然礦泉水產(chǎn)品和水源水需檢測(cè)產(chǎn)氣莢膜梭菌。

目前，檢測(cè)產(chǎn)氣莢膜梭菌多采用培養(yǎng)基法和PCR法。HiMedia公司（國(guó)際知名微生物培養(yǎng)基生產(chǎn)商）生產(chǎn)的M-CP平板——梭菌顯色培養(yǎng)基M1354（膜過(guò)濾法），根據(jù)Armon和Payment的配方而成。培養(yǎng)基中的胰蛋白?、酵母粉提供氮源營(yíng)養(yǎng)，蔗糖提供碳源營(yíng)養(yǎng)。溴甲酚紫為pH指示劑。吲哚β-D-葡萄糖苷為β-D-葡糖苷酶或纖維二糖酶的顯色底物，二磷酸酚酞用于檢測(cè)酸性磷酸化酶。添加的D-環(huán)絲氨酸和多粘菌素B（FD153）抑制伴隨的其他菌群。厭氧環(huán)境也提供了進(jìn)一步的選擇性。當(dāng)黃色（纖維二糖酶陰性）菌落在暴露于氨煙30秒后變?yōu)槊倒寮t時(shí)，即可認(rèn)為是產(chǎn)氣莢膜梭菌。顏色鑒別有時(shí)是困難的，因此，可挑取典型菌落（黃變粉色）和非典型菌落（綠色或沒(méi)變色）進(jìn)行驗(yàn)證。驗(yàn)證試驗(yàn)可通過(guò)硫還原、革蘭氏陽(yáng)性、芽孢桿狀、無(wú)動(dòng)力性、硝還原、明膠液化、乳糖發(fā)酵和其他生化試驗(yàn)證實(shí)。實(shí)踐證明，采用快速膜過(guò)濾技術(shù)和顯色培養(yǎng)基(M-CP培養(yǎng)基），簡(jiǎn)單、易行、可靠，HiMedia公司生產(chǎn)的M-CP培養(yǎng)基在國(guó)際上得到廣泛應(yīng)用，如 Raed S. Al-Wasify等人，用顯色介質(zhì)檢測(cè)水中某些病原菌的敏感性和特異性（Raed S. Al-Wasify, Al-Sayed A. Al-Sayed  and Mohamed M. Kamel. Sensitivity and Specificity of Chromogenic Media for Detection of Some Pathogens in Water[J]. International Journal of Environment and Sustainability, 2013, 2(1): 1-9.）