核酸檢測(cè)熒光pcr法是什么意思

核酸檢測(cè)熒光PCR法，也稱為實(shí)時(shí)熒光定量PCR（real-time fluorescent quantitative PCR，qPCR）技術(shù)，是一種用于檢測(cè)核酸的方法。它是基于聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）法的延伸，通過在反應(yīng)體系中加入熒光物質(zhì)，利用專門儀器實(shí)現(xiàn)實(shí)時(shí)熒光檢測(cè)，并對(duì)模板進(jìn)行定量計(jì)算。這種方法可以對(duì)待檢測(cè)樣本中的核酸進(jìn)行擴(kuò)增，從而更容易檢測(cè)出支原體。

熒光PCR法包括嵌入熒光染料法和熒光探針法，常用的熒光染料有嵌合型不飽和熒光染料SYBR GreenⅠ和飽和熒光染料ResoLight、Eva Green等，而常用的熒光探針包括TaqMan熒光探針、TaqMan MGB探針、鎖核酸(locked nucleotide acid, LNA)探針等。

締一生物提供的德國(guó)MB支原體熒光PCR檢測(cè)試劑盒（qPCR）均為探針法檢測(cè)，依據(jù)操作步驟的細(xì)微差別， 分『經(jīng)典法』和『一步法』兩種。   

此兩類試劑盒較全球其他廠家同類產(chǎn)品，具有以下獨(dú)特的優(yōu)點(diǎn)：

①經(jīng)典法支原體熒光PCR檢測(cè)試劑盒遵循歐洲藥典流程要求

②高特異性，一次檢測(cè)即可涵蓋了所有可能感染細(xì)胞的支原體物種（涵蓋歐洲藥典規(guī)定的9種支原體），根據(jù)序列一致性，至少可以檢測(cè)到107種支原體物種。操作簡(jiǎn)單，易于觀察（使用MB的試劑盒，下表中列出的支原體物種均為陽性，其他微生物或真核細(xì)胞均為陰性，無交叉反應(yīng)）。

③高靈敏度，MB公司的支原體qPCR檢測(cè)試劑盒經(jīng)典法最低檢測(cè)限可達(dá)到≤10CFU/ml。

MB公司的支原體qPCR檢測(cè)試劑盒一步法最低檢測(cè)限≥50個(gè)基因組/反應(yīng)。

④MB公司有相應(yīng)配套的10CFU/100CFU的敏感度測(cè)試的標(biāo)準(zhǔn)品，便于方法學(xué)驗(yàn)證。

⑤MB公司有相應(yīng)配套的支原體基因組DNA和細(xì)菌基因組DNA，便于特異性驗(yàn)證。

⑥MB公司有相應(yīng)配套的支原體絕對(duì)定量標(biāo)準(zhǔn)品，便于最后定量檢測(cè)。